Документ взят из кэша поисковой машины. Адрес оригинального документа : http://www.chem.msu.ru/rus/vmgu/112/149.pdf Дата изменения: Mon Jan 9 05:22:40 2006 Дата индексирования: Tue Oct 2 13:43:30 2012 Кодировка: Windows-1251 Поисковые слова: п п п п п п п п п п п п п п р р р р р р р р р р р р р р р р р р р р р р р р

ВЕСТН. МОСК. УН-ТА. СЕР. 2. ХИМИЯ. 2011. Т. 52. ? 2

149

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ХИМИЯ КОМПОНЕНТНЫЙ СОСТАВ ЭКСТРАКТОВ РАСТЕНИЙ, ВХОДЯЩИХ В СОСТАВ СБОРА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПАРОДОНТА
Д.А. Доброхотов, А.Н. Кузьменко, О.В. Нестерова, В.Ю. Решетняк, В.А. Попков, * Е.Б. Пашкова , А.В. Пирогов* (Первый московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова; * Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова; е-mail: kuzmenko.mma@ mail.ru)
Методом газожидкостной хроматографии с масс-селективным детектированием изучен компонентный состав летучей фракции экстрактов растений, входящих в состав сбора для лечения пародонта. Среди веществ-маркеров обнаружены: производные нафталина для календулы, производные фурана для череды и кровохлебки, специфические терпеноиды для солодки, тысячелистника и душицы. Все растения, входящие в состав сбора, за исключением календулы и лапчатки, были изучены на предмет содержания в них низших карбоновых кислот методом ионо-эксклюзионной хроматографии. Специфическими кислотами оказались для душицы - аскорбиновая и для солодки - янтарная.

Ключевые слова: газо-жидкостная хроматография, хромато-масс-спектромет рия, стандартизация растительного лекарственного сырья и растительных сборов, вещества-маркеры.

Газо-жидкостная хроматография (ГЖХ) и хроматомасс-спектрометрия (ГХ-МС) позволяют стандартизовать жидкие экстракты лекарственных растений по содержанию многих летучих веществ, из которых необходимо выделить специфические, присущие лишь одному виду растений, входящему в данный сбор. Данное исследование посвящено нахождению таких соединений-маркеров. Для этих целей в последнее время все чаще используют ГЖХ [1, 2]. Наша задача заключалась в изучении компонентного состава растений, входящих в состав сбора для лечения и профилактики воспалительных заболеваний пародонта, осложненных аллергическим состоянием. Сбор состоит из цветков календулы лекарственной (Flores Calendulae officinalis), травы череды т рехраздельной (Herba Bidentis tripartitae), травы тысячелистника (Herba Millefolii), травы душицы обыкновенной (Herba Origani vulgaris), корневищ и корней кровохлебки (Rhizomata et radices Sanguisorbae), корней солодки (Radices Glycyrrhizae), корневищ лапчатки (Rhizomata Tormentillae). Все растения, кроме кровохлебки лекарственной, входят в состав Фармакопеи (ГФ XI). Проверку подлинности сырья данных растений, согласно ГФ XI, проводят с помощью микро скопиче ского ана лиза (цветки календулы), качественных реакций на полиса-

хариды, восстанавливающие сахара, дубильные вещества (трава череды) и определения суммарного содержания эфирного масла методом перегонки с водяным паром (тысячелистник и душица). Вышеперечисленные методы определения подлинно сти являются недостаточными, по скольку, например, цветные реакции часто совпадают по своим признакам для широкого спектра сырья, количественно определяется обычно лишь сумма веществ. Если рассматривать литературные источники по изучению компонентного со става растений, входящих в данный сбор, то для календулы лекарственной биологически активными веществами обычно заявляются флавоноиды и эфирное масло, причем определяется обычно их суммарное содержание [3, 4]. Химический состав кровохлебки лекарственной изучается, как правило, на предмет содержания дубильных веществ [5]. Литературные данные по исследованию состава череды трехраздельной на содержание летучих веществ отсутствуют. Корневища лапчатки, по литературным данным, содержат дубильные вещества с преобладанием конденсированных танинов, свободные галловую и эллаговую кислоты, тритерпеновые сапонины (торментозид, сапогенин). Данные о летучих компонентах этого вида сырья не найдены.


150

ВЕСТН. МОСК. УН-ТА. СЕР. 2. ХИМИЯ. 2011. Т. 52. ? 2

Трава череды является сырьем для получения каротиноидов, хотя также содержит эфирное масло, горечи, полисахариды, флавоноиды, дубильные вещества. Данные о компонентном составе эфирного масла не найдены. Настой травы тысячелистника используют в стоматологии для полоскания кровоточащих десен, а т акже при стоматите и гингивите [6]. Некоторые летучие вещества в составе этого растения описаны в работе [7]. Химический состав другого вида душицы ( Origanum tytthanthum Gontsh) описан в работе [8]. Экспериментальная часть Пробоподготовка заключалась в том, что флакон с полученным экстрактом помещали в ультразвуковую в анну-меша лку "С апфир" б е з нагрев а на 10 мин. Затем отбирали 10 мл экстракта в пластиковую колбу и цент рифугирова ли на цент рифуге "Ohaus Split" при 16000 об/мин в течение 2 мин. Отбирали микродозатором 1 мл экстракта с поверхности для предотвращения попадания частиц сырья и помещали в барабан инжектора хромато-массспектрометра. Условия хроматографирования: колонка "Agilent Technologies HP-5MS" длиной 30 м и внут ренним диаметром 0,25 мм, температура колонки 30-240њС. Скоро сть подъема температуры 5њ/мин; конечный изотермический участок 10 мин. Температура испарителя 200њС. Температура инжектора 30њС; скорость газа-носителя (гелия) 1 мл/мин. Результаты и их обсуждение При изучении компонентного со ст ава экстракт а цветков календулы обращает на себя внимание наличие четырех гидропроизводных нафталина, из которых в других видах сырья мы обнаружили лишь -аморфен (в корнях со л одки). Специфиче скими для Calendula officinalis выступают также терпеновые углеводороды -кубебен, -кубебен, D-гермакрен и копфен (таблица). В целом, присутствие вышеперечисленных соединений может служить подтверждением подлинности сырья цветков календулы, и эти соединения могут выступать в роли специфических маркеров для этого растения. Специфическими веществами для лапчатки (Rhizomata Tormentillae) являются фурфурол и 3-фуральдегид, который найден также лишь в составе экстракта корневищ с корнями кровохлебки (таблица). Учитывая, что оба указанных растения присут ствуют в

сборе в виде корней и корневищ, можно предположить, что указанные производные фурана накапливаются в корневищах растения. При изучении со става экстракта корней солодки (Radices Glycyrrhizae) обращает на себя внимание наличие не скольких специфиче ских для этого вида сырья соединений: из числа терпеноидов - 1,3-циклогексадиен, 5-(1,5-диметил-4-гексенил)-2-метил-, туйен, из производных нафталина - -аморфен, из производных бензола - анетол, из группы алифатических спиртов - 2,3-бутандиол (таблица). Наличие анетола, считающего ся основным компонентом эфирного масла ряда растений семейства Apiaceae, представляет особый интерес. Трава тысячелистника (Herba Millefolii) содержит достаточно большой набор биологически активных веществ, среди которых выделяются компоненты эфирных масел - бициклические моно- и сесквитерпеноиды (камфора, борнеол, изоборнеол, изоборнилацетат, кариофиллен, бициклосесквифелландрен) (таблица). Если проводить сравнение с составом душицы (Herba Origani vulgaris) (таблица), которая наряду с тысячелистником стандартизуется в ГФXI по содержанию эфирного масла, то видно, что упомянутые соединения присутствуют лишь в траве тысячелистника, что позволяет различить данные виды сырья и определить наличие тысячелистника в готовом сборе. Такое редкое соединение, как -мирцен, может также служить индикаторным компонентом наличия данного сырья. В то же время -терпинен, -пинен (бициклический терпен) и цис--терпинеол (монотерпеновый спирт) присутствуют лишь в составе душицы (таблица). Эти данные хорошо согласуются с уже опубликованными результатами по разработке методик стандартизации ряда эликсиров [1] и настоек [2], а также с данными классиче ского т руда [9]. Нахождение в составе тысячелистника неидентифицированного производного нафталина (декагидро-8а-этил-1,1,4а,6-тетраметилнафталин) может быть в дальнейшем использовано для стандартизации и контроля качества этого сырья. В качестве специфического соединений для череды (Herba Bidentis tripartitae) можно отметить димексид (диметилсульфоксид) и производное пропилбензола -цимен (таблица). Для кровохлебки ( Rhizomata et radices Sanguisorbae) помимо упомянутого ранее 3-фуральдегида в каче стве веще ств-маркеров могут т акже выступать о-ксилен и карвон. Указанные производ-


ВЕСТН. МОСК. УН-ТА. СЕР. 2. ХИМИЯ. 2011. Т. 52. ? 2
Сравнение компонентного состава для всех растений, входящих в сбор
Лекарственные растения тысячелистник

151

календула

лапчатка

солодка

душица

Терпеноиды -Кубебен -Элемен -Кубебен -Фелландрен -Пинен -Терпинен К о п ф ен D-гермакрен (+)-Эпи-бициклосесквифелландрен Туйен Камфора орнеол Изоборнил ацетат Изоборнеол Лимонен o-Цимен o - К си лен Кариофиллен цис--Терпинеол Карвон Эвкалиптол п-мент-1-ен-8-ол 1,3-Циклогексадиен, 5-(1,5-диметил-4-гексенил)-2-метилЦиклогексен, 3-(1,5-диметил-4-гексенил)-6-метиленицикло(2.2.1)гексан, 4-метилен-1-(1-метилэтил)Производные бензола Анетол -Цимен Октагидро-7-метил-1Н-циклопента (1.3)циклопропа(1,2)бензол 2,4-третбутилфенол + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +

череда

Вещество

кровохлебка


152

ВЕСТН. МОСК. УН-ТА. СЕР. 2. ХИМИЯ. 2011. Т. 52. ? 2

Продолжение таблицы

тысячелистник

Вещество

Производные нафталина -Аморфен -Аморфен -Селинен -Кадинен Декагидро-8а-этил-1,1,4а,6-тетраметилнафталин Производные фурана 3-фуральдегид Фурфурол Производные азулена Виридифлорен Другие -Мирцен Транс-оцимен Уксусная кислота 2,3-бутандиол Циклобутан(1,2,3,4)дициклопентен, декагидро-3a-метил-6метиленДиметилсульфоксид Нонадекан + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +

ные бензола найдены только в составе данного растения. Уксусная кислота, как одна из наиболее летучих, хорошо определяется методом ГЖХ и обнаружена в составе лапчатки, кровохлебки, череды, календулы и тысячелистника. Тем не менее наиболее эффективным методом для определения низших карбоновых кислот является ион-эксклюзионная хроматография [10-13]. Ранее [13] все растения, входящие в состав сбора, за исключением календулы и лапчатки, были изучены на предмет содержания в них низших карбоновых кислот методом ионо-эксклюзионной хроматографии

(хроматограф "Kontron 430A" (Италия), детектор - УФ, = 210 нм, сорбент Aminex A5, элюент - 20 мМ раствор серной кислоты в воде). Специфическими кислотами оказались для душицы - аскорбиновая и для солодки - янтарная. В целом, ГЖХ показывает себя перспективным методом для ст андартизации и конт роля каче ства растительного сырья, входящего в состав сбора для лечения заболеваний пародонта, и в сочетании с различными видами ВЭЖХ (в частности, ионо-эксклюзионной) может использоваться в практике контролирующих аналитических лабораторий.

кровохлебка

календула

лапчатка

солодка

душица

череда


ВЕСТН. МОСК. УН-ТА. СЕР. 2. ХИМИЯ. 2011. Т. 52. ? 2 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Макаров В.Г., Краснов К.А., Тюкавкина Н.А., Руленко И.А. // Фармация. 1996. ? 5. С. 10. 2. Костенникова З.П., Копытько Я.Ф. // Фармация. 1996. ? 6. С. 41. 3. Слуева Е.К., Жукович Е.Н., Шарикова Л.А. // Фармация. 2003. ? 1. С. 13. 4. Костенникова З.П., Панова Г.А., Дамбраускене Р. // Фармация. 1984. ? 6. С. 33. 5. Попов Н.В., Андреева И.Н.,Гаврилин М.В. // Хим.-фарм. журнал. 2003. ? 7. С. 24. 6. Данилевский Н.Ф, Зинченко Т.Д., Кодола Н.А. Фитотерапия в стоматологии. Киев, 1984. 7. Сербин А.Г., Картмазова Л.С., Ткаченко Н.М. // Растительные ресурсы. 1987. 23. ? 2. С. 275.

153

8. Джумаев Х.К., Ткаченко К.Г., Зенкевич И.Г. // Растительные ресурсы. 1989. 25. ? 2. С. 238. 9. Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология. М., 2000. 10. Кузьменко А.Н., Панов В.П., Иванов А.А. и др. // Хим.фарм. журнал. 2002. ? 7. С. 44. 11. Кузьменко А.Н., Панов В.П., Иванов А.А. и др. // Хим.фарм. журнал. 2002. ? 10. С. 51. 12. Kuzmenko A.N., Ivanov A.A., Shpigun O.A. et al. 3-rd International Symposium on Separation in Bio Sciences, Moscow, Russia, 13-18 Мау (2003), Abstr. Р. 170. 13. Кузьменко А.Н., Иванов А.А., Евграфов А.А. и др. X Российский национальный конгре сс 'Человек и лекарство'. Москва, 7-11 апреля (2003). Тез. докл. С. 726.
Поступила в редакцию 20.01.10

THE COMPOSITION OF THE PLANT'S EXTRACTS USING TO PARODONTAL DISEASE BY CHROMATO-MASS-SPECTROMETRY
D.A. Dobrohotov, A.N. Kuz'menko, V.Yu. Reshetnyak, O.V. Nesterova, V.A. Popkov, Ye.B. Pashkova, A.V. Pirogov (I. M. Sechenov First Moscow State Medicine University, M.V. Lomonosov Moscow State University)
The composition of the five plants' extracts using to cure parodontal disease has been investigated by chromato-mass-spectrometry. Terpenoids, naphtalene derivatives, furan derivatives and some other substances were have been found as specific for these plants. The comparison of the extracts' composition has been done.

Key words: gas-liquid chromatography with mass-selectivedetector, officinal herbs, standartisation of the raw plant material and herb mixtures.
Сведения об авторах: Доброхотов Денис Анатольевич - ст. преп. кафедры общей химии Первого мо сковского го с ударственного ме дицинско го университета им. И.М. Сеченова; Ку зьменко Ал е кс ей Никол аевич - доцент кафедры общей химии Первого мо ско вского го сударственного медицинского университета им. И.М. Сеченова, канд. хим. наук (е-mail: kuzmenko.mma@ mail.ru) ; Решетняк Вл адимир Юрьевич - профе ссор кафедры общей химии Первого мо сковского государственного медицинского университет а им. И.М. Сеченова, докт. фарм. наук; Не стеров а Ольга Вл адимировна - профе ссор к афедры общей химии Перв ого мо с ков с кого го сударств енного медицинского университет а им. И.М. С еченов а, док т. фар м. наук; Попков Вл адимир Андреевич - профе ссор кафедры общей химии Первого мо ско вского го сударственного медицинского университета им. И.М. С еченова, докт. фарм. наук; Пашкова Ел ена Борисовна - аспирант кафедры аналитической химии химиче ского факультет а МГУ; Пирогов Андрей Владимирович - вед. науч. сот р. кафедры аналитиче ской химии химиче ского факультет а МГУ, докт. хим. наук.