Документ взят из кэша поисковой машины. Адрес
оригинального документа
: http://www.enzyme.chem.msu.ru/lucifer/
Дата изменения: Tue May 6 22:55:32 2003
Дата индексирования: Mon Oct 1 19:32:17 2012
Кодировка: Windows-1251
|
|
Лаборатория физико-химических
основ
биоконверсии энергии
Заведующий лабораторией
профессор, д.х.н.УГАРОВА
Наталья Николаевна
|
|
Почтовый адрес
Москва 119899
ГСП-3, Воробьевы Горы,
Московский
государственный университет им.М.В.Ломоносова,
Химический
факультет, кафедра химической энзимологии
Тел. 939-26-60,
939-26-52, Факс: 939-54-17, E-mail:unn@enz.chem.msu.ru
-
Лаборатория основана в 1980 г по инициативе заведующего
кафедрой химической энзимологии, члена-корреспондента АН СССР, профессора
Ильи Васильевича Березина, через пять лет после организации на химическом
факультете кафедры химической энзимологии. Со дня основания лаборатории
ее заведующим является профессор Угарова Наталья Николаевна.
-
В лаборатории работают 25 штатных сотрудников, которые
входят в состав нескольких самостоятельных научных групп.
-
Заведующий лабораторией профессор Н.Н.Угарова осуществляет
общее руководство лабораторией и возглавляет научную группу физико-химических
основ биоконверсии энергии.
|
В научной группе профессора Н.Н.Угаровой работают
7 научных сотрудников, 3 инженера, аспирант, дипломник, стажер, студенты.
Фамилия,имя,отчество |
Должность,науч. степень |
Адрес электрон. почты |
Угарова Наталья Николаевна |
Зав.лаб., д.х.н., профессор |
unn@enz.chem.msu.ru |
Бровко Любовь Юльевна |
вед.науч.сотр., д.х.н. |
. |
Дементьева Екатерина Игоревна |
ст.науч.сотр., канд.хим. наук |
eid@enz.chem.msu.ru |
Романова Надежда Анатольевна |
науч.сотр., канд.биол.наук |
. |
Леонтьева Ольга Владимировна |
науч.сотр., канд.хим.наук |
ovl@enz.chem.msu.ru |
Лебедева Ольга Владимировна |
науч.сотр., канд.хим.наук |
. |
Фрунджян Валерий Гайкович |
ст.науч.сотр., канд.тех.наук |
vgf@enz.chem.msu.ru |
Лундовских Ирина Александровна |
науч.сотр. |
ial@enzyme.chem.msu.ru |
Чудинова Елена Алексанровна |
аспирантка |
helench@enz.chem.msu.ru |
Основные результаты, ранее полученные
в лаборатории:
Тема: |
"Разработка научных основ биокатализа ферментом
пероксидазой и конструирование биоаналитических систем на основе пероксидазы"
Наиболее
существенные результаты:
- Изучены кинетика и механизм индивидуального
и совместного пероксидазного окисления различных субстратов.
- Выяснен механизм диссоциации и реконструкции
гембелкового комплекса пероксидазы.
- Разработаны методы стабилизации пероксидазы
путем химической модификации и/или оптимизации микроокружения фермента
в растворе и иммобилизованном состоянии.
- Исследовано ингибирующее действие
физиологически активных веществ и ряда лекарств на пероксидазу и разработаны
высокочувствительные методы анализа микроколичеств этих веществ с использованием
пероксидазы. |
Тема: |
"Физико-химические механизмы биоконверсии энергии
и функционирования биолюминесцентных систем, создание на их основе
методов биолюминесцентного экспресс-анализа в медицине, экологии, технологии
и научных исследованиях".
Наиболее
существенные результаты
- Расшифрован кинетический механизм реакций,
катализируемых люциферазой светляков.
- Открыта липидзависимая природа люциферазы светляков.
- Обоснован аллостерический механизм регуляции
субстратом каталитической активности фермента.
- Выяснена роль субъединичных взаимодействий
в катализе и стабилизации люциферазы.
- Описан механизм инактивации люциферазы
в процессе ее функционирования.
- Разработаны методы стабилизации и иммобилизации
фермента. |
Важнейшие результаты последних
лет и основные направления исследований, проводимых в настоящее время:
-
Предложен диссоциативный механизм образования электронно-возбужденного
продукта реакции и генерации света в люциферин-люциферазной системе светляков,
обоснована физико-химическая модель, описывающая взаимосвязь между максимумом
биолюминесценции и поляризуемостью, конформационной подвижностью активного
центра люциферазы, образующего микроокружение эмиттера.
-
Продолжаются исследования фотоиндуцированной
динамики биолюминесцентной люциферин-люциферазной системы светляка с использованием
пикосекундной лазерной спектроскопии и выяснения роли консервативного аминокислотного
остатка триптофана в этом процессе.
-
Развернуты генно-инженерные исследования люциферазы
светляков (клонирован ген и получена первичная последовательность люциферазы
светляков Luciola mingrelica, изучены кинетика и механизм экспрессии гена
люциферазы в клетках E.coli и доказана необходимость участия шаперонов
и АТФ в процессе трансформации вновь синтезированного белка люциферазы
в каталитически активную форму, сконструирована плазмида-суперпродуцент
рекомбинантной люциферазы для получения препаративных количеств фермента,
получены мутантные формы люциферазы методом направленного мутагенеза и
физико-химические характеристики рекомбинантной и мутантных люцифераз).
-
Продолжаются исследования активного центра
люциферазы светляков методами компьютерного моделирования третичной
структуры фермента и сайт-специфического мутагенеза.
Важнейшие результаты лаборатории
и современные направления прикладных исследований в области биолюминесцентного
анализа:
-
Разработаны состав и способы получения люциферин-люциферазных
реагентов (АТФ-реагенты) на основе растворимой и иммобилизованной люциферазы
для определения микроколичеств АТФ, АТФ-зависимых ферментов и их субстратов,
клеток микроорганизмов. Налажен выпуск АТФ-реагентов в лабораторных условиях
и проведена их успешная апробация в научных, медицинских и заводских лабораториях,
которая показала, что эти реагенты с успехом заменяют коммерческие АТФ-реагенты
зарубежных фирм, превосходя последние по стабильности.
-
Разработано с использованием АТФ-реагентов более
20 аналитических методик биолюминесцентного контроля микробиологической
чистоты пищевых продуктов, биологических образцов, воды, технологического
оборудования и т.д., в том числе такие, как например:
а) контроль процессов биокоррозии масел, смазок
и полимеров (включены в два Госстандарта);
б) экспресс-анализ микробной обсемененности ран
и антибиотикочувствительности (утверждены рекомендации Минздравом);
в) определение общей бактериальной обсемененности
сырого молока (утверждено Президиумом РАСХН).
-
Продолжаются работы по созданию методов биолюминесцентного
анализа специфических штаммов микроорганизмов, методов контроля процессов
апоптоза и выяснения роли АТФ в этих процессах.
-
Разрабатываются методы и исследуются механизмы разрушения
клеток микроорганизмов под действием фотодинамических эффектов.
-
Разрабатываются и оптимизируются методы получения
реагентов для биолюминесцентного анализа с использованием рекомбинантной
люциферазы светляков.
Список публикаций лаборатории
включает
более 200 научных работ: статей, обзоров, тезисов докладов, главы в ряде
монографий, 18 авторских свидетельств и 6 патентов.
Избранные публикации
-
J.H.Devine, G.D.Kutuzova, V.A.Green, N.N.Ugarova,
and T.O.Baldwin (1993) Luciferase from east european firefly Luciola
mingrelica: cloning and nucleotide sequence of the cDNA, overexpression
in Esherichia coli and purification of the enzyme. Biochim.Biophys.Acta,
1173, 121-132.
-
L.Yu. Brovko, N.A.Romanova, and N.N.Ugarova (1994)
Bioluminescent assay of bacterial intracellular AMP, ADP, and ATP with
the use of a coimmobilized three-enzyme reagent (adenylate kinase, pyruvate
kinase, and firefly luciferase). Anal. Biochem., 220, 410-414.
-
O.A.Gandelman, L.Yu. Brovko, A.Yu. Chikishev, A.P.Shkurinov,
and N.N.Ugarova, (1994) Investigation of the interaction between firefly
luciferase and oxyluciferin or its analogues by steady state and subnanosecond
time-resolved fluorescence. J. Photochem. Photobiol. B: Biol., 22, 203-209.
-
L.Yu.Brovko, O.A.Gandelman, T.E.Polenova, and N.N.Ugarova,
(1994) Kinetics of bioluminescence in the firefly luciferin-luciferase
system. Biochemistry (Moscow), 59, 195-201.
-
E.G.Bulanova, V.M.Budagyan, N.A.Romanova, L.Yu.Brovko,
and N.N.Ugarova (1995) Bioluminescent assay for human lymphocyte blast
transformation. Immonology Lett. 46, 153-155
-
E.I.Dementieva, E.E.Zheleznova, G.D.Kutuzova, I.A.Lundovskikh,
and N.N.Ugarova (1996) Physicochemical properties of recombinant Luciola
mingrelica luciferase and its mutant forms. Biochemistry (Moscow) 61, N1,
115-119.
-
I.A.Lundovskikh, E.I.Dementieva, and N.N.Ugarova
(1998) Immobilization of recombinant firefly luciferase. Physicochemical
properties and application. Biochemistry (Moscow), 63, N 6, 691-696.
-
N.N.Ugarova, L.Yu.Brovko, and E.I.Dementieva
(1998) Bioluminescence and Chemiluminescence.In: Luminescence of Solids.
D.R.Vij, ed. Plenum Press, N.Y., London, 391-411.
По всем вопросам и с пожеланиями обращайтесь,пожалуйста,
по адресу:
unn@enz.chem.msu.ru
Данная страница создана в марте 1999 года, последние
изменения сделаны 6 мая 2003 г.
[English
version of this page]
Вернуться на страничку кафедры
Общая
информация | Научные
подразделения | Учебный
процесс | История
кафедры
Полезные
ссылки | Новости
| О сервере
ї 1998-1999 Кафедра Химической
Энзимологии, Химический Факультет
Московский Государственный Университет
им. М.В. Ломоносова