Документ взят из кэша поисковой машины. Адрес оригинального документа : http://kodomo.fbb.msu.ru/FBB/StudentScience/themes_2007s/Spiridonova_1.doc Дата изменения: Fri Jan 26 15:23:30 2007 Дата индексирования: Tue Oct 2 12:40:05 2012 Кодировка: koi8-r

Тема: «Изучение термодинамических параметров комплекса тромбина с ДНК-
аптамером»


Научный руководитель

с.н.с. НИИФХБ им. Белозерского
Спиридонова В.А.

В норме организм поддерживает гемостатический баланс, который
нарушается при повреждении сосудов, а также при патологических процессах,
приводящих к геморрагиям (кровотечения при недостаточном синтезе тромбина)
или при его избыточном синтезе (тромбоз). Нужны эффективные средства,
которые позволяют тонко регулировать данный баланс, не сдвигая равновесие
в ту или другую сторону.
Используемые в настоящее время лекарственные препараты жестко сдвигают
данное равновесие, что часто вызывает побочные эффекты.
Тромбин - ключевой фермент свертывания крови. Он участвует как в
реакциях свертывания крови, так и в противосвертывающих процессах.
В настоящее время разработан метод SELEX, который позволяет
нарабатывать аптамеры, небольшие фрагменты нуклеиновых кислот, обладающих
высоким сродством к белку, в данном случае к тромбину. Аптамеры служат
ингибиторами протеолитической активности тромбина, и тем самым выступают в
роли новых лекарственных препаратов, которые к тому же не вызывают
аллергических последствий.
В данной работе будет изучен специфический комплекс ДНК-аптамера с
тромбином. in vitro. Нуклеопротеидные комплексы характеризуются константами
диссоциации, значения которых позволяют оценить его стабильность, и
следовательно, специфичность взаимодействия белка с нуклеиновой кислотой.
В работе будут использованы различные методы: получение набора
радиоактивно-меченных ДНК-аптамеров с помощью PCR, электрофорезы для
характеристики белка, фильтрация на нитроцеллюлозных мембранах, расчет
термодинамических параметров ДНК-тромбиновых комплексов.
Приглашаются студенты 1, 2 курсов.