Клинико-иммунологические критерии диагностики герпесвирусной инфекции новорожденных

Н.И. Кудашов, В.Г. Помелова, В.В. Зубков, Т.А. Быченкова, Н.С. Осин, Л.З. Файзуллин, Л.В. Ванько

В начало...

Среди показателей, характеризующих остроту инфекционного процесса, противовирусные IgM-антитела выявлялись у 13-15% новорожденных, антигены этих вирусов - у 15-30%, вирусная ДНК - у 30-70%. Полученные результаты подтверждают существующие представления о ненадежности диагностики герпесвирусной инфекции у новорожденных на основе определения IgM-антител [5]. Частота обнаружения антигенов вируса простого герпеса методом ЛИФА и ДНК этого вируса методом ПЦР была сопоставима и коррелировала с наличием патологии у детей. Частота выявления антигенов цитомегаловируса в ЛИФА была существенно ниже по сравнению с определением ДНК методом ПЦР. По-видимому, чувствительность метода ЛИФА недостаточна для детекции этого вируса, концентрация которого в биологических жидкостях, как правило, низкая.

Совокупность клинико-иммунологических данных, полученных нами при обследовании новорожденных и их матерей, позволила установить критерии диагностики герпесвирусной инфекции у новорожденных (табл. 5).

Таблица 5. Клинико-иммунологические критерии диагностики герпесвирусной инфекции у новорожденных
Оцениваемые показатели		Форма герпесвирусной инфекции
		врожденная	группа риска
Со стороны ребенка	Пневмония	+	+
	Наличие кист, отека головного мозга	+	+
	Гепатоспленомегалия	+	+
	Затянувшиеся желтухи	+	+
Концентрация сывороточных	IgM общ.	Выше нормы	Норма или ниже
	IgА общ.	> >	> >
Наличие специфических маркеров	IgG спец. (ОП > 1,0)	+	±
	IgМ спец.	+	-
	антиген	+	-
	ДНК	+	-
Эффективностьтрансплацентарной передачи IgG	концентрация IgG общ.	Ниже нормы	Норма
	IgG мат// IgG ребенка спец. >/= 1,25	+	±
Со стороны матери	Наличие более 3 факторов внутриутробного инфицирования, в том числе носительство вирусов простого герпеса и цитомегалии	+	+
	эпизоды генитального герпеса в анамнезе	+	+
	проведение иммуносупрессивной терапии	+	+
Примечание. IgG мат/IgG спец., IgM спец. - концентрация антител классов G и М к вирусу простого герпеса и цитомегалии у матери (IgG мат.) и ребенка (IgG cпец., IgM спец.); IgG общ., IgМ общ., IgА общ.- общие сывороточные иммуноглобулины у ребенка.

В соответствии с разработанными критериями, диагноз врожденной инфекции, обусловленной вирусом простого герпеса и/или цитомегалии, был установлен у 50 (87,7%) из 57 обследованных новорожденных, что послужило основанием для назначения детям этой группы курса иммунохимиотерапии. Семь детей вошли в группу риска по развитию инфекции на основании выявления факта нарушения трансплацентарной передачи специфических IgG к герпесвирусам и факторов внутриутробного инфицирования у матерей. Детям этой группы было показано проведение иммунотерапии, соответственно в лечебных и профилактических целях.

Обсуждение

В связи с латентным течением, слабо выраженной симптоматикой и частыми рецидивами, в диагностике герпесвирусной инфекции решающую роль играют иммунологические методы, основанные на выявлении специфических маркеров, свидетельствующих об инфицировании вирусами простого герпеса и/или цитомегалии и остроте обусловленного ими инфекционного процесса. Иммунологическая диагностика у новорожденных дополнительно осложнена особенностями их иммунной системы, выражающимися в недостаточной выработке специфических противовирусных IgG и материнском происхождении IgG, а также, как правило, низкими концентрациями вирусспецифических антигенов и ДНК в биологических жидкостях.

Разработанные к настоящему времени критерии диагностики, как правило, основаны на изучении роли моноинфекции в заболевании детей [12], хотя при наличии клинических поражений этиология заболеваний носит смешанный характер. В связи с этим по-прежнему актуальным является установление четких критериев диагностики герпесвирусной инфекции у новорожденных на основе комплексного клинико-иммунологического обследования детей и их матерей [4].

Принципиально важным этапом такого обследования является установление формы инфекции у матери, базирующееся на анализе акушерско-гинекологического и соматического анамнеза, течения настоящей беременности, а также иммунологических данных.

У обследованных нами женщин рецидивирующая форма инфекции, обусловленная вирусом простого герпеса и/или цитомегалии, была установлена у 61,4%, латентная (бессимптомная) - у 38,5%.

Дети от матерей с рецидивирующей формой инфекции в 97,1% случаев рождались с патологией, в структуре которой преобладали тяжелые формы поражения.

Принципиально важным для достижения максимальной информативности диагностики является выбор адекватных методов и их оптимального сочетания. При этом определяющими критериями являются не только характеристики собственно метода, прежде всего чувствительность и специфичность, но и диагностическая и прогностическая значимость получаемых с его помощью результатов.

Наиболее популярным высокочувствительным и специфичным методом серодиагностики, позволяющим выявлять противовирусные IgG- и IgМ- антитела, является твердофазный ИФА.

IgG к вирусам простого герпеса и цитомегалии выявлялись у подавляющего большинства новорожденных (у 91,2 и 92,9% соответственно). В связи с материнским происхождением иммуноглобулинов этого класса и зависимостью уровня IgG у ребенка от эффективности их трансплацентарной передачи, мы посчитали целесообразным ввести показатель, характеризующий соотношение специфических IgG у матери и ребенка. Использование этого показателя в сочетании с данными о пониженной концентрации сывороточных IgG позволило выявить нарушение трансплацентарной передачи иммуноглобулинов, в том числе противовирусных антител у 30-50% новорожденных, причем гораздо чаще у больных детей (р<0,05). Этот показатель имеет прогностическое значение для оценки риска развития неонатальной патологии и позволяет обосновать целесообразность проведения иммунотерапии.

IgМ-антитела являются ценным показателем остроты инфекционного процесса у матерей, несмотря на возможность определенной как гипо-, так и гипердиагностики. В связи со способностью плода к самостоятельной выработке IgМ, их обнаружение у новорожденного свидетельствует о протекании врожденной инфекции и позволяет установить ее этиологию [13]. Действительно, сывороточные IgМ, в том числе с повышенной концентрацией, чаще определялись у детей с различными формами поражения, чем у детей контрольной группы. Вместе с тем специфические IgМ к вирусу простого герпеса и цитомегалии удалось выявить лишь у 3,5 и 8,7% детей соответственно, что подтверждает данные других исследователей об ограниченной диагностической ценности этого показателя [13]. Другим маркером острой инфекции у матерей могут являться IgGр. В связи с низкой концентрацией этих антител, важное значение имеет чувствительность используемого для их определения метода. Результаты этого теста в 48% случаев совпадали с данными по определению IgМ, а их сочетанное применение позволило дополнительно установить острую форму цитомегаловирусной инфекции у 9 женщин.

Вирусспецифические антигены и ДНК являются важными показателями врожденной инфекции у новорожденных. При выявлении маркеров вируса простого герпеса число положительных находок, обнаруженных методами ЛИФА (антигены) и ПЦР (ДНК), было сопоставимым и коррелировало с наличием заболевания у детей. При выявлении маркеров цитомегаловируса число положительных результатов ПЦР было выше, что свидетельствует о ценности этого метода для диагностики врожденной герпесвирусной инфекции у новорожденных. Вместе с тем отмеченный ранее факт обнаружения ДНК к цитомегаловирусу у части детей из контрольной группы может свидетельствовать о гипердиагностике, что обусловливает необходимость дополнительной оптимизации разработанных методик анализа и тест-систем.

Российский вестник перинатологии и педиатрии, N5-1998, с.12-18

Литература

1. Адаскевич В.П. Заболевания, передаваемые половым путем. Витебск 1997; 177-192.

2. Сухих Г.Т., Ванько Л.В., Кулаков В.И. Иммунитет и генитальный герпес. М - Нижний Новгород - М 1997; 224.

3. Dwyer D.E., Cunninghan A.L. Herpes simplex virus infection in pregnancy. Baillier's Clin Obstet Gynec 1993; 7: 1: 75-105.

4. Кудашов Н.И. Герпесвирусные инфекции у новорожденных. Вопр охр мат 1991; 5: 3-5.

5. Львов Н.Д., Никитина А.А., Свешников П.Г. и др. Исследование набора современных методов исследования для экспресс-диагностики герпесвирусных инфекций в клиническом материале гинекологического, офтальмологического и стоматологического профиля. Герпесвирусные инфекции. М 1990; 72-74.

6. Gosch G., Bretschneider S., Korb C. et al. Perinatal herpes infection. Clinical aspects therapy follow up Kinderarztl Prax 1993 Aug; 61:6: 202-206.

7. Зубков В.В., Кудашов Н.И. Опыт применения цефобида при генерализованной вирусно-бактериальной инфекции у новорожденных. В сб.: IV Российский национальный конгресс <Человек и лекарство>. М 1997; 222.

8. Soini E., Hemmila I. Fluoroimmunoassay: present status and key problems. Clin Chem 1979; 25: 3: 353-361.

9. Звонарев А.В., Шаталин К.Ю., Кличко В.И. и др. Получение рекомбинантных полипептидов вирусов герпеса простого типов 1 и 2. Вопр вирусол 1994; 3: 110-113.

10. Pomelova V.G., Lavrova N.A., Gaidamovich S.Ja. et al. Detection of tickborne encephalitis virus in ixodid ticks collected in natural foci by timeresolved fluoroimmunoassay. Acta virologica 1992; 36: 260- 268.

11. Whitley R.J. Neonatal Herpes simplex virus infection. J Med Virol 1993; 1: 13-21.

12. Plachter B., Jahn G. Cytomegalovirus Diagnostics: Standard Procedures and Perspectives. Biotest Bulletin 1990; 4: 107-118.

13. Vestergaard B.F. Laboratory Diagnosis of Herpes Virus Infections. In: Diagnosis and Treatment of Herpes Simplex Infections. Proc. 1st Intern. Symp.on Thromantadine. Marbella (Spain). 1986 March; 17-26.